-
為什么 HPLC 色譜柱比 GC 色譜柱短？
? ? ? ? HPLC和GC是已在化學(xué)實(shí)驗(yàn)室中站穩(wěn)腳跟的分離技術(shù)。這兩種技術(shù)的基本目的是分離和量化有機(jī)混合物的成分。 ? ? ? ? 您有沒有想過為什么HPLC色譜柱比 GC 色譜柱更短更寬。在回答這個(gè)問題之前，您應(yīng)該了解柱長(zhǎng)度的好處。 ? ? ? ? 一、柱長(zhǎng)： ? ? ? ? 隨著液相色譜柱長(zhǎng)度的增加，洗脫化合物和固定相之間的相互作用時(shí)間...Read more -
液相色譜中的過濾器和過濾作用
? ? ? ? 以“清潔”流動(dòng)相將樣品輸送至液相分析柱對(duì)于穩(wěn)健的方法和高質(zhì)量的結(jié)果非常重要。過濾器與高效液相色譜 (HPLC) 儀器的正確、可靠運(yùn)行有關(guān)。 ? ? ? ? 過濾器和過濾的主題在 LC 中非常重要，因?yàn)槿绻鲃?dòng)相流路中存在微粒，LC 系統(tǒng)中的許多組件很容易過早失效。例如，從溶劑瓶中抽出的流動(dòng)相中的灰塵或其他顆粒會(huì)導(dǎo)...Read more -
使用 HPLC 純化綠茶中的多酚
? ? ? ? 綠茶被廣泛認(rèn)為是地球上最健康的飲料之一?？v觀歷史，綠茶一直被用作治療多種疾病的民間療法，今天它繼續(xù)被提倡作為補(bǔ)充和替代藥物，雖然它一直備受爭(zhēng)議?，F(xiàn)代研究并沒有消除這些長(zhǎng)期存在的假設(shè)，而是讓人們相信綠茶相關(guān)的健康益處。 ? ? ? ? 綠茶的藥用特性源自茶樹種，廣泛歸因于該植物的高酚含量。使用高效液...Read more -
液相保護(hù)柱的作用
? ? ? ? 任何HPLC或UHPLC柱都是有試用壽命的。正確使用和維護(hù)色譜柱可以延長(zhǎng)其使用壽命，有利于該方法的經(jīng)濟(jì)性。重要的是遵循公認(rèn)的色譜慣例，如適當(dāng)?shù)臉悠分苽洌悠窇?yīng)通過0.45μm的膜過濾器進(jìn)行高效液相色譜過濾，通過0.22μm的過濾器進(jìn)行超高效液相色譜過濾）；流動(dòng)相的適當(dāng)質(zhì)量/純度（例如，用于等度模式的等度...Read more -
液相色譜工作流程
??????? 無論正在利用何種相互作用，液相柱色譜法都分六個(gè)步驟進(jìn)行： 柱平衡 樣品裝載 洗滌 洗脫 清洗 色譜柱再生 ???????? 一、柱平衡： ??????? 大多數(shù)液相色譜方案從樹脂平衡步驟開始。與目標(biāo)蛋白質(zhì)和所選樹脂相容的緩沖液通過柱子。一種常見的做法是用 5-10 柱體積 (CV) 的平衡緩沖液平衡柱。例如，蛋白質(zhì)與疏水相互...Read more -
梯度洗脫后的色譜柱重新平衡的時(shí)間
? ??????? 許多用戶對(duì)溶劑梯度洗脫分離后 LC 色譜柱應(yīng)該重新平衡多長(zhǎng)時(shí)間有疑問。在這里，我們展示了對(duì)于反相和 HILIC 分離而言，再平衡周期短的令人滿意的結(jié)果。 ??????? LC 用戶通常會(huì)提出和討論關(guān)于在溶劑梯度洗脫分離后重新平衡 LC 色譜柱多長(zhǎng)時(shí)間的問題。在本文中，我們根據(jù)最近對(duì)該主題的研究討論了細(xì)節(jié)，并表明即...Read more -
高效液相色譜法提取和純化木糖醇
??????? 高效液相色譜法是提取和純化甜味劑木糖醇的可靠技術(shù)。木糖醇在食品工業(yè)中被廣泛用作替代甜味劑；它的甜味與蔗糖相似，熱量只有三分之二。這種五碳糖存在于許多植物中，但大多濃度較低（約 1%），因此提取和純化成本很高。因此，迄今為止，木糖醇主要通過化學(xué)方法生產(chǎn)，使用催化木糖脫氫。 ? ??????? 一、在木糖...Read more -
保持液相色譜柱柱溫有助于準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性
??????? 溫度的變化會(huì)對(duì)色譜分析方法的重現(xiàn)性和色譜柱的壽命產(chǎn)生重大影響。但為什么會(huì)這樣？恒譜生在以下的內(nèi)容將會(huì)為您介紹。 ??????? 一、再現(xiàn)性 ??????? 隨著溫度的變化，液相色譜柱內(nèi)固定相和流動(dòng)相之間的熱力學(xué)會(huì)受到直接影響。在不同溫度下運(yùn)行方法可能會(huì)影響分析物容量因子 (k) 或分析物在色譜柱上的保留時(shí)間。 ?...Read more -
HPLC溶劑進(jìn)樣口過濾器過濾流動(dòng)相的重要性
? ??????? 緩沖液是一種含有弱酸及其共軛堿（或弱堿及其共軛酸）的水溶液。加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿后，緩沖溶液的 pH 值變化很小，當(dāng)小的環(huán)境因素發(fā)生變化時(shí)，有助于抵消分析方法中的條件變化。緩沖溶液用于將 pH 值保持在幾乎恒定的值。由于這種弱酸 (HA) 與其共軛堿之間存在平衡，它們對(duì) pH 變化具有抵抗力。 ??????? 一、...Read more -
高效液相色譜儀器組成
??????? HPLC 色譜儀器可以是一組單獨(dú)的模塊或元件，但也可以設(shè)計(jì)為單個(gè)裝置。模塊概念在單個(gè)組件失效的情況下更加靈活；此外，系統(tǒng)各個(gè)零件不必來自同一制造商。如果您不喜歡自己進(jìn)行小修，您會(huì)更喜歡緊湊型儀器。然而，這并不需要比模塊化套件更少的工作臺(tái)空間。 ??????? 一臺(tái) HPLC 儀器至少具有溶劑罐、帶篩板的傳輸...Read more -
深入了解液相色譜柱小型化
??????? 雖然質(zhì)譜聯(lián)用液相色譜已被證明是發(fā)現(xiàn)組學(xué)（蛋白質(zhì)組學(xué)、脂質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、食物組學(xué)和糖組學(xué)）領(lǐng)域的強(qiáng)大工具。組學(xué)研究經(jīng)常受到樣本復(fù)雜性的挑戰(zhàn)。在處理少量樣品、小體積和復(fù)雜的樣品基質(zhì)（生物流體和單細(xì)胞分析）時(shí)，對(duì)感興趣的分子進(jìn)行識(shí)別和量化可能特別困難。液相色譜柱小型化可以克服這些挑戰(zhàn)。減小色...Read more -
HPLC 基礎(chǔ)知識(shí)——所有關(guān)于液相色譜的基礎(chǔ)知識(shí)
??????? 液相色譜作為最常用的色譜被廣泛應(yīng)用于生物、化學(xué)、食品分析等領(lǐng)域，hplc的種類有哪些？恒譜生帶你了解！ ??????? 一、液相色譜的種類 1、吸附色譜 以硅膠或氧化鋁為固定相。分子與硅膠之間的弱相互作用鍵稱為吸附，鍵的溶解解吸。由于洗脫液分子先于樣品分子占據(jù)硅膠的活性位點(diǎn)，因此樣品分子只有在與活性位點(diǎn)...Read more -
C18 固定相在反相方面最常用的原因及其工作原理
??????? 將C18 固定相稱為用的最多的化學(xué)物質(zhì)之一可能更合適。在色譜柱供應(yīng)商中，這一階段的不斷增長(zhǎng)的品種肯定不少。然而，在我們深入研究手頭的主題之前，這里簡(jiǎn)要回顧一下 C18 固定相是如何產(chǎn)生的。 ??????? 一、反相色譜 ??????? 隨著更多科學(xué)家參與反相色譜該領(lǐng)域，色譜中引入了額外的分離模式，以分離和純化許多不...Read more -
高效液相色譜及其部件介紹
??????? 高效液相色譜(HPLC) 是一種流行且用途廣泛的技術(shù)，可為復(fù)雜有機(jī)樣品的成分的分離、鑒定和定量提供經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的解決方案。了解各個(gè)組成部分以及每個(gè)組成部分如何有助于分析的整體可靠性非常重要。 ??????? 一、高效液相色譜及其部件介紹 系統(tǒng)主要組成部分為： 泵 探測(cè)器 根據(jù)應(yīng)用產(chǎn)生無限數(shù)量的其他配置。比如流動(dòng)...Read more -
色譜分析里的柱層析
??????? 柱層析被描述為一種有用的技術(shù)，其中待分離的物質(zhì)被置于裝有吸附劑（固定相）的柱子的最高點(diǎn)上，以不同的速率通過柱子，這取決于每種物質(zhì)對(duì)吸附劑的親和力。吸附劑和溶劑或溶劑混合物，并且通常在不同時(shí)間從柱中通過時(shí)聚集在溶液中。 ??????? 兩種最常見的柱色譜固定相是硅膠和氧化鋁，而有機(jī)溶劑被認(rèn)為是最常見...Read more -
HPLC保護(hù)柱的使用原理
??????? HPLC 色譜柱是液相色譜的重要組件，因?yàn)樗秦?fù)責(zé)分離基質(zhì)中分析物的色譜柱。保護(hù)和保養(yǎng)色譜柱可確保我們不僅獲得可靠的結(jié)果，還能無故障操作。我們都知道 HPLC 色譜柱的使用壽命是有限的，但是如何確保獲得最長(zhǎng)的使用壽命呢？ 要回答這個(gè)問題，讓我們首先看看色譜柱可能被阻塞的原因。 ??????? 一、引入 HPLC 色...Read more -
使用制備液相色譜的工作流程和技巧
??????? 本文的重點(diǎn)是快速液相色譜和高效液相色譜。沒有一種完美的協(xié)議適合每一種分離目的。因此，建議為您的特定應(yīng)用程序優(yōu)化方法。通過本文中列出的建議以及一些前期閱讀和測(cè)試，您將輕松純化您正在尋找的組件。 ??????? 一、快速液相色譜純化 ??????? 使用快速色譜法進(jìn)行純化的缺點(diǎn)是該方法固有的分辨率較低?？焖僖?..Read more -
hplc液相色譜系統(tǒng)準(zhǔn)備緩沖液的技巧
???????? 液相色譜是世界各地實(shí)驗(yàn)室使用的流行純化技術(shù)。如果系統(tǒng)設(shè)置和操作正確，它可以立即從混合物中分離出所需的化合物。學(xué)習(xí)如何使用和制備緩沖液和溶劑是能提高系統(tǒng)性能的重要技巧之一。準(zhǔn)確制備和正確選擇緩沖液對(duì)于在液相色譜中獲得可重復(fù)的結(jié)果至關(guān)重要。 ????????? 一、了解您的化合物 ????????? 如果您正在尋...Read more -
質(zhì)譜和液相色譜
??????? 質(zhì)譜 (MS) 使研究人員能夠研究許多特性，例如樣品的分子量、結(jié)構(gòu)、特性、數(shù)量和純度。當(dāng)與液相色譜技術(shù)相結(jié)合能成為一種強(qiáng)大的分析工具，能夠從復(fù)雜的生物混合物（如牛奶、血清和全脂）中提取有關(guān)一系列化合物的有意義的數(shù)據(jù)，包括藥物代謝物、肽和蛋白質(zhì)-細(xì)胞裂解物。 ??????? 一、液相色譜與質(zhì)譜 ??????? 在將...Read more -
選擇還是不選擇UHPLC
??????? UHPLC是一種專門的色譜方法，與 HPLC 相比，它運(yùn)行速度更快、分辨率更好并且使用的溶劑更少。UHPLC 通過使用填充較小顆粒（通常直徑小于 2 μm）的較小色譜柱來實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)。生物化學(xué)、細(xì)胞和分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和許多其他領(lǐng)域的研究人員依靠 UHPLC 從混合物中分離不同類型的分子——無論這些分子是蛋白質(zhì)、肽、代...Read more -
HPLC 色譜柱挑選指南
??????? 一、分離模式 ??????? 選擇色譜柱的首要任務(wù)是選擇分離模式。分離分子的方法有很多，其中應(yīng)用最廣泛的包括反相、正相、親水相互作用、離子交換和尺寸排阻 HPLC。還有一些不太常見但更專業(yè)的分離模式，例如使用手性固定相或流動(dòng)相的特定手性色譜。 ??????? 反相色譜柱通常用于非極性或弱極性有機(jī)化合物，它包含非...Read more -
維護(hù)液相色譜柱良好狀態(tài)指南
??????? 將色譜柱保持在最佳狀態(tài)將大大有助于改進(jìn)和標(biāo)準(zhǔn)化您的分離操作，同時(shí)確保色譜柱的使用壽命。您可以采取以下措施來實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)。 ??????? 一、注意清潔。如果您從一開始就注意并定期清潔，那么色譜柱 的使用壽命會(huì)更長(zhǎng)。清潔色譜柱所需的溶劑、酸或堿的類型取決于它們的設(shè)計(jì)和吸附劑的具體類型。雖然有些色譜柱...Read more -
超高效液相色譜—UHPLC改進(jìn)大蛋白質(zhì)分子的分離度
??????? 首次將 UHPLC 用于小分子分離時(shí)，能得到很好的峰形，但是蛋白質(zhì)峰的分離幾乎沒有那么好，因此通常不可能顯著縮短運(yùn)行時(shí)間。然而，最近對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)一步改進(jìn)讓UHPLC 可以提供更好的分離度和更短的運(yùn)行時(shí)間。雖然 UHPLC 不能讓科學(xué)家始終看到蛋白質(zhì)之間的所有差異，但它可以讓他們看到一些差異——例如，在大體形態(tài)、...Read more -
如何選擇HPLC還是UHPLC？
??????? UHPLC是一種專門的液相色譜方法，與 HPLC 相比，它運(yùn)行速度更快、分辨率更好并且使用的溶劑更少。UHPLC 通過使用填充較小顆粒（通常直徑小于 2 μm）的較小色譜柱來實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)。生物化學(xué)、細(xì)胞和分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和許多其他領(lǐng)域的研究人員依靠 UHPLC 從混合物中分離不同類型的分子——無論這些分子是蛋白質(zhì)、肽...Read more
