影響色譜柱使用壽命的主要因素有哪些？
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1、流動(dòng)相因素
流動(dòng)相pH值：不同基質(zhì)的填料對(duì)pH值的耐受范圍各異。例如，無定形硅膠在純水中的溶解度約為100mg/L，在pH1～9的范圍內(nèi)溶解量幾乎恒定。因此，硅膠基質(zhì)填料的適用pH范圍大約是1～8，鍵合相硅膠填料由于鍵合層的保護(hù)作用，其適用pH范圍顯著擴(kuò)大。以C18(十八烷基硅烷鍵合硅膠)為例，其pH適用范圍可達(dá)2～10，當(dāng)流動(dòng)相pH值低于2時(shí)，鍵合相容易水解流失;高于10時(shí)，硅膠加速溶解，釋放出絮狀物堵塞柱子。這些反應(yīng)在高溫(>40℃)環(huán)境下尤為明顯，會(huì)迅速降低柱效，導(dǎo)致色譜柱報(bào)廢。
流動(dòng)相變質(zhì)：硅基鍵合相填料是目前使用最廣泛的類型。當(dāng)流動(dòng)相為水溶液或含有磷酸鹽緩沖液時(shí)，易滋生細(xì)菌或霉菌，堵塞固定相顆粒間的空隙。對(duì)于多元自動(dòng)比例混合的高效液相色譜儀，水相或緩沖鹽相獨(dú)立存放，長時(shí)間存放更易引發(fā)此類問題。
流動(dòng)相純度：填料顆粒粒徑通常在3～10μm，孔徑在6～10nm。色譜柱使用過程中，大量流動(dòng)相通過，若流動(dòng)相含有微量不溶性雜質(zhì)顆粒，會(huì)在柱頭部位被截留，長期積累導(dǎo)致色譜柱機(jī)械性堵塞，柱壓升高，無法正常使用。
流動(dòng)相極性：流動(dòng)相的極性對(duì)色譜柱也有一定影響。極性較大的物質(zhì)如甲醇、水、冰醋酸等會(huì)破壞硅膠填料柱;極性較小的物質(zhì)如正丁醇、二氯甲烷等會(huì)破壞化學(xué)鍵合硅膠柱;堿性溶液會(huì)破壞陽離子交換樹脂色譜柱，酸性溶液則容易損壞陰離子交換樹脂柱。
2、樣品因素
樣品溶解性：樣品配制時(shí)，若少量微粒未能完全溶解，會(huì)隨樣品進(jìn)入色譜柱，沉積在柱頭處，造成堵塞。
樣品純度：樣品中可能含有待分析組分以外的各種組分或雜質(zhì)，這些組分或雜質(zhì)可能在柱內(nèi)產(chǎn)生不可逆吸附，覆蓋固定相的活性點(diǎn)，改變保留特性。
樣品化學(xué)性質(zhì)：待測試樣中的組分與填料之間應(yīng)具有化學(xué)穩(wěn)定性。例如，在使用氨基鍵合柱時(shí)，應(yīng)避免使用含羰基的化合物和流動(dòng)相(如丙酮、乙酸乙酯等)，以免固定相中的NH2與酐、酮發(fā)生希夫(Schiff)縮合，導(dǎo)致固定相破壞。
3、其他因素
柱壓影響：過高的柱壓會(huì)對(duì)色譜柱的填料造成機(jī)械損傷，降低柱效，縮短使用壽命。
溫度影響：溫度過高會(huì)加速填料的降解和流動(dòng)相的變質(zhì)，影響色譜柱的穩(wěn)定性和壽命。
色譜柱沖洗：正確的沖洗方法可以有效去除色譜柱內(nèi)的殘留物和雜質(zhì)，延長使用壽命。不當(dāng)?shù)臎_洗方式可能導(dǎo)致填料損壞或柱效下降。
色譜柱安裝：正確安裝色譜柱，確保流向與箭頭一致，連接緊密，可以避免漏液和柱效損失等問題，對(duì)色譜柱的使用壽命有重要影響。
發(fā)布于: 2025-01-13